miRNA-375在肝癌患者血清表达和疗效评估的研究价值
摘 要：目的 全面研究mi RNA-375在肝癌患者血清之中的具体含量，并分析其表达情况和临床的疗效评估参考价值。方法 选择该院2019年2—9月40例前来治疗的肝癌患者为观察组，同时选择同期40例来该院前来治疗的肝硬化等肝部疾病患者设置为对照组，mi RNA使用芯片进行检测，确定出肝癌与良性肝脏肿瘤之中mi RNA的表达差异，使用荧光测量方式对肝脏肿瘤检测。结果 mi RNA-375在观察组患者的血清和血液组织之中的表达量较高，其中，对照组患者的表达量是0.656（2-ΔC1），观察组是2.987（2-ΔC1），两组之间对比差异有统计学意义（t=5.898,P<0.001），发现血清之中的mi RNA-375表达水平高低与患者的TMN分期，癌组织分化有关联，差异有统计学意义（P<0.05）。mi RNA-375的含量和表达水平高低与患者的年龄和性别之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论 mi RNA-375在肝癌患者的血清中表达含量增加，可以进行肝癌的疾病预后评判指标。
关键词：miRNA 肝癌 血清 研究价值
肝癌是常见的恶性肿瘤之一，其致死率较高，在所有的癌症之中致死率排名第三。肝癌患者的早期症状没有特异性[1]，很多患者在发现或者出现症状之后已经是晚期，该疾病的复发率相对较高，即使进行手术，也常会复发，患者5年之内的存活率较低。临床对于肝癌的研究一直都是热点，研究肝脏的肿瘤标志物对证实肝癌有着重要的作用[2]，现有的临床研究之中，mi-RNA的的异常数量表达往往标志患者体内的肿瘤生长，但是研究中缺乏对mi RNA-375的有效研究，缺乏对其与肝癌关系的分析，该文即选取该院2019年2—9月治疗的40例肝癌患者为研究对象，探讨mi RNA-375在肝癌患者血清中的表达，以判别其对肝癌患者预后的临床价值，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择该院40例前来治疗的肝癌患者，设置为观察组，同时选择同期40例来该院前来治疗的肝硬化等肝部疾病患者设置为对照组。观察组患者中，男性共计26例，女性共计14例；年龄为40～77岁，平均年龄为58±4.7岁。对照组患者中，男性共计25例，女性共计15例；年龄为41～79岁，平均年龄为59±5.1岁。以上两组患者一般资料对比，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。该次研究经过医院的伦理委员会批准，患者全部知情同意。
1.2 方法
1.2.1 试剂选择
选择mi RNA3芯片，产自美国，使用mi RNA提取试剂盒，肝癌荧光定量检测试剂盒，产自大连，mi RNA-375及其内参引物。
1.2.2 实验方法
首先进行患者血清标本的提取和保存，首先采集患者与健康对照组人员的静脉血液共计3～5 m L，以上所有血液标本中，筛选出非黄疸和溶血性血液的标本[3]，在常温的环境之下进行静置处理，在30 min之后，进行血清的离心处理，使用3 000r/min的离心机器进行长达20 min的离心处理，确保析出上清液后，放入RNA酶之中的-100℃超低温冰箱中进行保存处理[4]。其次进行RNA的提取处理，将血清标本从超低温冰箱中取出之后，迅速放入常温水中进行解冻处理，以上的血清提取量完全依照RNA的提取试剂盒说明进行，确保ENA保存于无RNA酶的EP管之中后，立刻进行PCR的逆转录处理[5]。根据逆转录的说明要求进行逆转录操作，但是mi RNA的分子长度较短，可以使用加尾的方式进行转录处理，在无RNA酶的EP管中进行PCR的逆转录。根据荧光检测试剂盒的相关要求，进行荧光检测，在90℃的环境下进行检测处理，反复循环，在50次循环后进行荧光信号采集，采集重复3次之后取平均数值为最终结果。最终记录患者血液中mi RNA-375的基因表达量[6]。
1.3 统计方法
采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计量资料用
表示，行t检验；计数资料用频数和百分比（%）表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者体内mi RNA的表达情况对比
观察组患者血清中mi RNA不同基因表达谱存在一定差异，对比对照组患者体内的mi RNA情况，共计35个mi RNA基因变化显着，其中，mi RNA-27a、mi R-NA-30a、mi RNA-490基因在两组之间差异无统计学意义（P>0.05）。mi RNA-375含量变化情况较为显着，基因在两组之间差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
表1 两组患者体内的mi RNA表达情况对比（2-ΔC1)
2.2 观察组患者血清中的mi RNA表达水平影响因素分析
血清之中的mi RNA-375表达水平高低与患者的TNM分期情况，癌组织分化有关联，差异有统计学意义（P<0.05)。mi RNA-375的含量和表达水平高低与患者的年龄和性别之间差异无统计学意义（P>0.05)，见表2。
表2 观察组患者血清中mi RNA表达水平影响因素分析（2-ΔC1)
3 讨论
mi RNA是一种内源性的小分子非编码形RNA，其稳定性较高，且能够有效调节机体靶细胞基因的表达情况，并且有效参与调控机体的生命活动，在细胞乃至于肿瘤之中发生发展中,发挥着重要的调节作用。近年来，mi RNA被发现与癌症等疾病有着较强的关联度[7]，因此其逐渐成为了临床对于肿瘤标志物的重要选择，该次研究中首先选择了几种具有代表性的mi RNA，并通过文献研究的形式讨论，充分探索了mi RNA对于肝癌患者的疾病指示作用，后来又通过对照实验的方式，全面的分析了mi RNA-375含量与肝癌患者年龄，性别，等等临床病理学参数之间的关系，以期探讨其疾病诊断价值[8]。
根据过往的临床研究不难发现，mi RNA-27a、mi RNA-30a、mi RNA-490等临床物质已经被证实与乳腺癌，胃癌等多种类型的临床恶性肿瘤密切有关，具体来说，在乳腺癌中，mi RNA-20a可以促进集体中的生长因子分泌乳腺癌肿瘤存活素等，并通过该物质的不断表达来促进肿瘤细胞的生长，分化和后期转移[9]。临床证明，mi RNA-27a在乳腺癌中呈现高表达态势，且表达数量越高，乳腺癌的预后相对更差，5年之内的存活率低。对于前列腺癌症，恶性肿瘤指导表示因子mi RNA-30a可以通过对干细胞生长因子的干预，有效抑制表皮生长因子的表达，患者的前列腺细胞中皮间质转化被抑制，肿瘤扩散速度不断提高[10]。在该次研究中，全面研究了mi RNA中mi RNA-20a与mi RNA-30a的表达情况与患者疾病情况的对比，结果发现，对于肝癌患者和正常肝病患者的临床分析中，mi RNA-490被认为是一种可能的抑制癌症基因，现阶段已经从膀胱癌，结直肠癌等恶行肿瘤中表达差异不显着，但是在肝癌患者和肝疾病患者中呈现上调态势。但是在该次研究中，mi RNA-27a、mi RNA-30a、mi RNA-490 3种物质的表达含量差异无统计学意义（P>0.05）。但是3种物质与肝癌之间的关系需要进一步确定。
Mi RNA-375基因的生物学功能较为强大，能够进行各类临床癌症基因的转录，并有效控制着细胞的生长增殖等，很多甚至参与了葡萄糖对胰岛素分泌等，在临床的恶性肿瘤之中，mi RNA-375的身份为癌基因，并直接影响着各类恶性肿瘤的生长和转移[12-14]。该次研究表明40例肝癌患者血清中mi RNA-27a、mi RNA-30a、mi RNA-490基因在观察组和对照组之间差异无统计学分析意义（P>0.05）。血清mi RNA-375含量变化情况显着，基因在观察组和对照组之间差异有统计学意义（P<0.05）。mi RNA-375的含量和表达水平高低与患者的年龄和性别之间差异无统计学意义（P>0.05)，血清中的mi RNA-375水平高低与患者的TMN分期情况、癌组织分化有关联（P<0.05)。李俊等研究表明[11]，原发性肝癌组患者血清mi RNA-375表达量低于肝硬化组、肝炎组和健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01);mi RNA-375在原发性肝癌组、肝硬化组、肝炎组和健康对照组血清中的表达量，差异有统计学意义（P<0.01）；原发性肝癌组患者经肝动脉栓塞化疗治疗后mi RNA-375表达量为较治疗前上升，差异有统计学意义（t=7.658,P<0.01），与该研究结果一致。王保永等[15]研究主要探讨了肝癌患者与一般肝部疾病患者体内的mi RNA表达情况，结果发现，RT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织中mi RNA表达显示，一般肝病患者中mi RNA-375的含量是2.234，与癌旁组织肝病患者3.233相比，mi R-375的m RNA在肝癌组织中的表达水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)，其结果与该研究结果一致。
综上所述，mi RNA-375在肝癌患者的血清中表达含量增加，可以进行肝癌的疾病预后评判指标，且其在临床病理学分期，肿瘤细胞分化程度等方面有着较好的指示性作用。
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