56℃灭活对生化激素检测结果的影响
摘 要：目的：探讨血清经56℃加热30 min灭活对生化项目、激素项目等重要指标检测结果的影响。方法：选取2020年2月门诊及住院患者的血清学标本990份，对血清样本进行56℃加热30 min灭活处理，对灭活前和灭活后的血清分别检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、超敏C反应蛋白(CRP)、总胆汁酸(TBA)、激素项目人绒毛促性腺激素(HCG)、促甲状腺激素(TSH)、血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、总甲状腺素(TT4)、游离甲状腺素(FT4)等指标水平，比较灭活前后各项目结果的差异。结果：灭活后的ALT、CK水平显著低于灭活前，差异有统计学意义(P<0.05)；灭活前后的AST、CRP、TBA水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；灭活前后的HCG、TT3、FT3、TT4、FT4、TSH水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：血清加热灭活法对AST、CRP、TBA、HCG、TSH、FT3、TT3、FT4、TT4水平的检测无影响，尤其是对妇产科相关重要的诊疗项目HCG、TBA和TSH的检测均无影响，可在检测前先进行灭活，以降低检验人员的风险。
关键词：加热灭活 生化激素 降低实验室感染
实验室职业暴露可发生在实验室工作或逗留的任何时间，感染途径包括呼吸道吸入、经口摄入、针刺活锐器刺伤接种、皮肤黏膜污染等。呼吸道传播的微生物主要存在于气溶胶中并可以引起人类感染。微生物气溶胶对人类的生命健康有极大的影响[1]，全球因微生物气溶胶引起的呼吸道感染率可高达20%。新型冠状病毒肺炎(COVID-19)其主要传播途径是呼吸道飞沫和密切接触传播，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播可能[2]，人群普遍易感。有文献报道指出，56℃加热30 min可灭活新型冠状病毒[3]，提示实验室人员可考虑在检测新型肺炎患者及疑似患者的血清样本(通常放在密闭的真空采血管内)前先进行加热来灭活新冠状病毒，降低实验室人员职业暴露风险。本研究探讨56℃加热30 min灭活处理血清样本是否会对血清样本检测造成影响，现报告如下。
资料与方法
选取2020年2月门诊及住院患者的血清学标本990份，本研究所用均为临床常规检测剩余血清，免除知情同意。
仪器与试剂：仪器包括GPN隔水式恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司生产)、雅培C16000(美国生产)、罗氏e602(德国生产)、雅培i2000(美国生产)。试剂包括生化试剂(AST、ALT、CRP、TBA均为雅培原装试剂，CK为中生试剂)，激素试剂(HCG由罗氏公司提供，TSH、FT3、TT3、FT4、TT4均由雅培公司提供)，所有试剂均在有限期内。
方法：采集受试者肘静脉血于静脉真空采血管中，2 h内行1 760×g、3 000 r/min、10 min离心，上机检测。灭活后采用患者检测后的剩余血清样本管放在56℃隔水式恒温箱30 min后取出，待其降至室温后，进行生化和激素检测。检测方法：严格按照仪器和试剂说明书操作检测。
统计学方法：数据采用SPSS 17.0软件分析；呈正态分布的数据以(±s)表示，采用t检验；非正态分布的数据以中位数(四分位数间距)M(Q)的形式表示，采用秩和检验；P<0.05为差异有统计学意义。
结果
血清灭活前后常规生化项目检测结果比较：灭活后的ALT、CK水平明显低于灭活前，差异有统计学意义(P<0.01)；灭活前后的AST、CRP、TBA水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1 血清灭活前后常规生化项目检测结果比较[M(Q)]
血清样本灭活前后激素检测结果比较：灭活前后的HCG、TT3、FT3、TT4、FT4、TSH水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。
表2 血清样本灭活前后激素检测结果比较[M(Q),(±s)]
讨论
加热灭活病毒的方法不引入任何的化学试剂，仅需控制温度和时间，能使病毒的高级结构受到破坏，其蛋白不再有生理活性，从而失去感染、致病和繁殖能力[4-5]。本研究结合该病毒的理化特性和对临床实验室存在的潜在传染风险情况，对血液标本在常规检测前先将其离心分离后在未开盖情况下放置56℃环境温育30 min进行病毒灭活处理，达到降低生物安全风险目的，比较灭活处理前后常见项目的检测结果。结果显示，生化项目中ALT、CK灭活前后影响较大，因加热破坏了酶的活性，导致结果偏低，而AST、CRP、TBA项目灭活前后并没有显著影响[6]。其中TBA水平改变是妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)最主要的实验室证据，ICP是妊娠期一种重要的妊娠期并发症，ICP是妊娠期一种重要的妊娠期并发症，也是导致围产儿病死率的主要原因之一，为ICP的诊断和治疗提供了重要依据，同时也降低了围产儿病死率；激素项目中，HCG灭活前后无显著影响，为早孕期正常妊娠、宫外孕、先兆流产的诊断和治疗发挥了极其重要的作用；甲状腺常规五项均没有显著性差异，为妊娠期甲减的诊断和治疗提供了重要依据[7]。
综上所述，56℃加热30 min灭活法不需昂贵的仪器设备、简单易行，对AST、CRP、TBA、HCG、TT3、FT3、TT4、FT4、TSH水平无影响，可在检测前标本进行灭活处理，以降低检验人员感染风险。然而，本研存在一些不足，样本较少且覆盖检验项目少[8]，在后续研究中应加大样本量并增加检验项目，将有助于进一步明确灭活处理对检验科各个项目检测结果的影响，为降低临床检验人员的感染风险提供新策略[9]。可考虑作为实验室相关项目检测时防止医源性感染切实可行的血清标本处理方法。
参考文献
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